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丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA Kit

更新時間:2025-11-26

簡要描述:

丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA Kit相關產品小鼠 DKK3 D-RIBOSED-核糖高純級白色精細粉末COLDsigma
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產品名稱

丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA Kit

英文名稱

Human pyruvate dehydrogenase E1 (PDH E1) ELISA Kit

貨號

BH-G63437

試劑和器材:
1. 標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof
5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等

試劑盒組成及試劑配制
1.酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2.
標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/
4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9.
濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10.
終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項:
1加樣:
實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成邊緣效應,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為AB兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但AB液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
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操作流程:
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
1.有質量問題免費包換,合同上注明了的(質量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結果,等等!)
2.全程技術指導.(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結束后的數據分析,有任何疑問,我們技術都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,我們為你節省時間,幫你出結果,原始數據,分析數據均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務!
為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩,可以加快、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸,使得反應過程更加*,OD值通常會比未振蕩孵育的結果要高;洗滌過程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度,具體操作請參見說明書。

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